广东技师院校哪个好考点

检验技师考点:抗血清的保存

检验技师考点：抗血清的保存

(1)经签定合格后的抗血清，以1：

100比例加入1%的硫柳汞或5%的叠氮钠，使其最后浓度分别为0.01%或0.05%.

(2)用无菌滴管将抗血清分装小管，每管装1ml左右。

(3)-20℃以下保存，可保存2年以上。

(4)如有条件可将血清冷冻干燥保存于4℃以下，保存时间更久。

制备：

1、动物的选择

羊、马、鸡、猴、豚鼠，都是常用的免疫动物，在实验中，选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。免疫用动物应选适龄、健壮.最好为雄性。最常用的实验动物是家兔，一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖的♂性，体重2 ～3公斤，健康家兔三只，免疫前用金属编号牌固定兔耳，或用染料涂沫在动物的背部，作出明确的标记。

2、抗原制备

1)抗原稀释：用灭菌生理盐水将抗原稀释为2mg/ml，于免疫前一天加入溶液，使每毫升抗原溶液含青霉素1000 UI，链霉素1000 UI，放4℃过夜(一般可不加青、链霉素)次日取出，与佐剂混合制成乳剂后用于动物免疫。

免疫原的注射剂量应考虑其抗原性的强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。对于纯的可溶性抗原的免疫剂量，通常小鼠首次抗原剂量为50～100μg/次，大鼠为100～200μg/次，兔为100μg ～1 mg/次，合成免疫原为2 mg(半抗原约为20～200μg)，一般需要与等量的福氏完全佐剂混合。加强免疫的剂量为首次计量的1/2，通常用不完全福氏佐剂或不用佐剂。如需制备高度特异性的抗血清，可选用低剂量抗原短程免疫法;反之，欲获得高效价的抗血清，宜采用大剂量抗原长程免疫法。

2)佐剂和抗原乳剂的配制

1佐剂的配制：福氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant)，各实验室的配方不尽相同，我室采用的配方如下：

医用液体石腊 20毫升

羊毛脂 12克

水浴溶化、混匀，分装于青霉素小瓶，用纱布、线绳扎紧瓶塞。8磅20分钟灭菌，4℃保存备用。于免疫前准备抗原乳剂制备时，以活卡介苗(有时亦用死卡介苗)代替死结核菌，每毫升试剂中加入10mg活卡，即为福氏完全佐剂。

2抗原乳剂的制备：其方法一般有两种，其一，将等量的完全佐剂(注意佐剂必须预先加热融化，但不超过50℃)和抗原溶液分别吸入两个5ml注射器内，在两个注射器的12# 针头间套上一根长约8～12cm的医用无毒塑料管，将两个注射器连接在一起(塑料管必须先经酒精浸泡消毒，使用时取出，用灭菌生理盐水冲洗后，与注射器针头相连接，塑料管与针头的口径须合适，不能松，稍紧些为宜)，针头*塑料管约1～2cm然后由两人相对而坐后缓缓推动针蕊，使管内溶液进入塑料管道至对侧注射器内，每次推动针蕊时必须把管内容物全部推出，另一侧也同样操作，使管内液体往返混合，直至形成油包水乳剂(Water-in-oil enulsion)为止。

其二是，将等量的佐剂和抗原溶液倒入钵内，经过反复碾磨，也可形成油包水乳剂，该法主要优点是快速，可靠，不足方面主要是由于粘附过多，浪费佐剂及抗原。

制成的乳剂是否形成油包水乳剂直接影响免疫效果，因此，必须进行质量检查，检查的方法是将制成的乳剂滴一滴在凉水(自来水)表面，质量合格的乳剂滴入水面保持滴珠完整而不分散，不合格者进入水面后立即扩散，水面油亦逐渐扩大，这就必须要继续操作至质量合格为止。

但有时，由于佐剂的配制质量原因，很难乳化至合格，遇有这种情况，须考虑重新配制佐剂。

3、免疫途径，剂量和免疫周期

抗原注射途径可根据不同抗原及试验要求，选用皮内、皮下、肌肉、静脉或淋巴结内等不同途径注入抗原进行免疫。一般常采用背部、足掌·耳后等处皮内或皮下多点注射。初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2～4周。常规免疫方案为抗原加CFA皮下多点注射进行基础免疫;再以免疫原加IFA作2～5次加强免疫，每次间隔2～3周，皮下或腹腔注射加强免疫。

1)常规(皮内多点注射)免疫：

1第一次免疫：剂量为每只兔子注射1.0 ml抗原乳剂(含抗原量1～2mg)。注射部位为两只后脚掌的皮内各注射0.2 ml，其余0.6 ml分多点注入脊柱二侧，颈部，腹股沟和腋窝等处淋巴结附近部位皮内，每点可注入0.05ml，分12点注入。

2第二次免疫：初次免疫后20天左右，剂量为1.0ml/只(1～2 mg/ml)，加福氏不完全佐剂。注射部位在腹部皮下多点注射，每点注入0.1 ml。

3第三次免疫：再次免疫后两周内进行，注射剂量和部位同第二次免疫，免疫后7～14d抽取少许静脉血，分离血清，试血测定效价。

2)淋巴结免疫：主要优点是可减少用量。过程如下：

1卡价苗致敏：免疫前足掌皮下每侧各注入活卡价苗(75 mg/ml)0.3 ml。10天左右观察两侧�N窝淋巴结，一般可肿胀如蚕豆大小，此时即可进行淋巴结内免疫注射。

2第一次免疫：用手指定淋巴结后在两侧�N窝淋巴结内各注入抗原乳剂0.25ml，每只兔总量0.5 ml;为加强免疫，于初次免疫20天后，于腹部皮下多点注射不加佐剂抗原溶液1mg/1ml。

3二周后可如同第一次免疫的剂量和途径再注射一次，一般可在第三次免疫注射前试血滴定效价，效价如已达到要求可不必进行第三次免疫。

有条件的.情况下，免疫后要加强动物饲料管理，如给熟黄豆饲养等。

3)腹腔免疫：一般不必加佐剂，适用于细胞性或颗粒性抗原，而且抗原性较强者，例如用绵羊红细胞免疫家兔或小鼠即可用此法。

4、试血，测定抗体效价

一般在第三次免疫后7～10天即可于兔耳静脉或小鼠尾尖取少量血，分离出血清之后进行试血。

① 环状试验，较为经典的方法，目前较少采用，如与20μg/ml以下的抗原于30 min内能出现“艹”的沉淀环，即测定抗体效价达1：5000以上时为合格。

② 免疫双扩散法，这是最常用的试血方法，其具体方法是，中间孔加稀释的抗原(1mg/ml)10μl，周围孔顺时针方向加制备的抗血清分别为1:2, 1:4, 1:8，1:16，1:32和1:64，(用生理盐水或PBS稀释)。经37℃保温24h后观察结果，效价在1:16以上即可决定放血。

5、放血

经效价检查合格后即可放血。放血前动物应停食12 h，以减少血清中的脂肪含量。如拟保留该免疫动物，可直接由心脏取血，或切开耳缘静脉滴血或心脏穿刺取血。取血后由静脉缓缓注入等量5%葡萄溶液以补足失血量。取血的动物经2～3个月休息，可再次加强免疫后取血。如拟一次放血致死，可用颈动脉放血的方法，各种取血方法如下。

1)心脏取血：固定动物于仰卧位置，用食指探明心脏博动量高部位(在胸骨左侧，由下向上数第3与第4助骨之间，指兔)，剪去少许毛，用2.5% 碘酒和75%酒精消毒后，以9#针头在预定位置与胸部呈45。角刺入心脏，微微上下移动针头，待见血液进入针筒后，即将注射器位置固定取血。

2.5公斤体重的家兔一次可取血20～30ml。

2)耳缘静脉滴血：先将耳缘静脉附近的毛剪去用无菌棉球将皮肤擦干净(不用酒精消毒，避免溶血)。用台灯照射耳部使血管因温度增高而扩张，然后用无菌刀片将耳缘静脉切一长0.5cm的纵切口，第一次切口应从耳尖部开始，以后再切时，逐步向耳根方向移动。用无菌试管或平皿收集流出的血液。如切口凝血，血流不畅时，可用无菌棉棒轻轻将切口外血凝块擦去(注意勿使切口损伤太大)，血流仍可继续流出，直至达到所需要的血量为止。取血后用无菌棉球压迫切口止血。耳缘静脉取血一次可取血50ml左右而动物不死。

3)颈动脉放血：使动物仰卧固定四肢，颈部剪毛、消毒后纵向切开前颈部皮肤长约10cm，用止血钳将皮肤分开夹住，剥离皮下组织，露出肌层，用刀柄加以分离，即见搏动的颈动脉。小心将颈动脉和迷走神经剥离长约5cm，选择血管中段，用止血钳夹住血管壁周围的筋膜。远心端用丝线结扎，近心端用动脉钳夹住，用酒精棉花球消毒血管周围，用无菌剪刀剪一V形缺口。取长2.5cm、直径为1.6mm塑料管一段，将一端剪成针头样斜面，并将此端插入颈动脉中，另一端放入200ml无菌三角瓶内，然后放开止血钳，血即流入三角瓶内，动物流血至死，2.5公斤家兔可放血80～100ml。

6、分离血清

必须在无菌条件下进行，待收集于平皿或三角瓶内的血液凝固之后，用无菌滴管在无菌环境(例如超净工作台)中把血块与瓶壁剥离后，放入37℃，1～2h取出后放入4℃过夜，使血清充分析出(不能冰冻，否则产生溶血)，经离心沉淀分出血清，放进低温冰箱保存。使用前必须经过签定合格后再分装保存备用。

广州较好的技校

如下

1、广州市机电高级技工学校：

广州市机电技师学院坐落于美丽的珠江河畔，由原中共中央顾问委员会委员、中共中央组织部原副部长曾志同志在1958年创建，是广州市人力资源和社会保障局属下公办全日制职业学校。

2、广州高级技工学校：

广东省高级技工学校是一所由省政府主办、省劳动和社会保障厅主管的国家级重点技工院校。广东省高级技工学校分别在广州、茂名南海等设立校区，其中茂名南海校区是规模最大、设施最齐、学科最全、环境最好的现代化校区，列入全国招生计划。

3、广州城市职业技工学校：

广州城市技工学校，是一所具有广泛影响的综合型技校。坐落在龙眼洞森林公园、凤凰山森林公园、火炉山森林公园环抱的风景区。风景秀丽，交通便利。多年来，学校以严格的管理、良好的校风、优良的教学质量享誉华南，多次被上级主管部门评为教育先进单位。

4、广州港技工学校：

广州港技工学校是一所师资力量雄厚，教学设备先进，生活设施齐备，管理机制完善、校园环境优美的省重点技校，被广州市人民政府评为教育工作先进单位。

学校拥有教学楼、电教楼、实习工厂、综合实验楼、物流机械实训场、学生宿舍等建筑群体；有一支结构合理、教学和管理经验丰富、管理能力强、技艺精湛的教师队伍，具有研究生、本科以上学历和高、中级职称的教师占85%。

5、广州白云技师学院：

广州市白云工商技师学院是国家级重点技工院校。成立于1989年，是全国青年创业培训基地、广东省高技能人才实训基地、广东省高技能人才培养示范基地、广东省技师培养基地、广州市高技能人才公共实训基地、广东省智能楼宇专业职业研发应用基地。

广州技术学校哪个最好

1、白云工商技师学院

广州白云工商技师学院已经有三十多年的办学历史，连续七年蝉联广东省技工学院竞争力排名第一。白云技师学院目前所开设的专业都是以实用技术型专业为主，包括电子商务、物联网技术应用、工业机器人、汽车维修、幼儿教育、计算机网络、会计、服装设计、市场营销、机电一体化等多个专业。

2、广东省高级技工学校

广东省高级技工学校是广东省人民政府主办，广东省人力资源和社会保障厅直属的副厅级公办国家级重点技工院校。是广东省历史最长、规模最大、综合实力最强的国家级重点技工院校。学校共开设65个专业，其中高级工以上专业40个，职业技能鉴定工种44个，年培训量4.7万人次，年鉴定量2.1万多人次。

3、广东省轻工业技师学院

创建于1974年，广东省人民政府主办，是直属广东省人力资源和社会保障厅的副厅级技师学院。是国家中等职业教育改革示范学校、国家高技能人才培养示范基地。2018年9月27日，被国家教育部确定为“国家中等职业教育改革发展示范学校”。

4、深圳技师学院

深圳技师学院是深圳市政府全额投资兴办的全日制高等技工院校，是深圳市人力资源和社会保障局直属的一所培养应用型、复合型、创新型知识技能人才的国家级重点技工院校。学院设有多种培养层次和学制：初中起点四年制高技班、初中起点五年制高技班、高中起点三年制高技班、高中起点四年制预备技师班、高中起点四年制技师班。

5、广东省岭南工商第一技师学院

成立于1974年，是广东省人力资源和社会保障厅直属的全日制公办重点技师学院，是全国示范性技工院校。学院建有汽车服务、机电一体化、机械加工、工业机器人、计算机应用等5个复合型重点实训基地，拥有机电一体化、汽车检测与维修、工业机器人等3个中央财政支持的国家高技能人才培训基地。

以上内容参考：百度百科-白云工商技师学院

以上内容参考：百度百科-广东省高级技工学校

以上内容参考：百度百科-广东省轻工业高级技工学校

以上内容参考：百度百科-深圳技师学院

以上内容参考：百度百科-广东省岭南工商第一技师学院